本发明公开了优化的甘露聚糖酶基因及其重组植物表达载体和应用。本发明将甘露聚糖酶基因通过密码子优化以及提高mRNA二级结构稳定性等措施得到SEQ ID NO.1所示的优化甘露聚糖酶基因；本发明进一步构建了含有原始甘露聚糖酶基因或优化甘露聚糖酶基因的重组植物表达载体并将其转化到玉米中筛选得到种子中高效表达甘露聚糖酶的转甘露聚糖酶基因玉米植株；酶学性质测定表明，优化的甘露聚糖酶基因能在玉米中稳定、高效的表达及遗传，所表达的甘露聚糖酶酶活以及稳定性显著高于原始甘露聚糖基因在玉米中所表达的甘露聚糖酶的酶活及稳定性。
本发明公开一种甘露聚糖酶基因AbMan5、重组表达质粒、重组表达菌株、甘露聚糖酶及其应用，其中，所述甘露聚糖酶基因AbMan5用于编码甘露聚糖酶，所述甘露聚糖酶基因AbMan5的核苷酸序列如SEQ IDNO：1所示，编码所得的甘露聚糖酶的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。本发明提供的甘露聚糖酶基因AbMan5，由其编码所得的甘露聚糖酶在高温下具有高活性，且pH稳定性良好，可用于动物饲料添加剂、食品添加剂以及甘露寡糖的制备。
本发明涉及基因工程领域，具体地，本发明涉及优化的β-甘露聚糖酶基因MAN及其毕赤酵母表达载体。本申请对核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的β-甘露聚糖酶基因进行改造，得到优化基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。构建了优化β-甘露聚糖酶基因的重组毕赤酵母表达载体并将其转化到毕赤酵母感受态细胞X33中筛选得到高效表达β-甘露聚糖酶的转β-甘露聚糖酶毕赤酵母菌株；酶学性质测定表明，优化的β-甘露聚糖酶基因能在毕赤酵母中稳定、高效的表达及遗传，所表达的β-甘露聚糖酶酶活性以及稳定性显著高于原始β-甘露聚糖酶基因毕赤酵母中所表达的β-甘露聚糖酶的酶活性及稳定性。
本发明公开了一种甘露聚糖酶及其编码基因与应用。该甘露聚糖酶，是具有下述氨基酸残基序列之一的蛋白质：1)序列表中的SEQ ID №：2；2)将序列表中SEQ ID №：2的氨基酸残基序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有甘露聚糖酶活性的蛋白质本发明的甘露聚糖酶活性高，巴氏毕赤酵母(Pichia pastoris)MAN22 CGMCCNo.1389中甘露聚糖酶的表达量可达200000IU/mL发酵液，比现有甘露聚糖酶的产量高，生产成本低。本发明的甘露聚糖酶可以用于制备甘露寡糖。
